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消除凝胶色谱柱的脱水现象的步骤
点击次数:617 发布时间:2018/1/23
   凝胶色谱柱的填料是亲水而刚性,多孔球型,化学和机械性能都非常优异的聚合物。凝胶色谱柱适用于以凝胶色谱的模式分析分离蛋白质、多肽、多糖、寡糖、DNA、RNA、水溶性的有机聚合物和其他水溶性大分子样品等。
  凝胶色谱柱的安装和使用:
  1.在连接色谱柱之前,预先用即将使用的流动相体系置换以前用的流动相体系。
  2.在连接色谱柱时,要赶走因色谱柱保存不当或长时间不用在色谱柱的进口或者出口处产生的一些气泡。
  3.连接凝胶色谱柱要注意标示的色谱柱进出口方向。
  4.如果分析所用的温度较高,应在较低的流速下比如0.2到0.3ml/min的流速下缓慢地升高温度,当温度达到设定温度后,再慢慢地增大流速至设定值。
  5.如果色谱柱需要较长的时间才能平衡稳定,检查色谱柱连接处是否有漏液。
  消除凝胶色谱柱的脱水现象的步骤:
  1. 按照相反的流动方向将色谱柱连接到液相系统上;
  2. 不要将色谱柱与检测器相连;
  3. 以推荐最大流速的一半流速,使用滤过的20%乙醇超纯水溶液进行色谱柱的过柱;注意:反相色谱柱需要使用60%的乙醇。
  4. 继续重复上述程序,直到您确信色谱柱已经再水化处理完毕。再水化处理可能需要几个小时的时间,这取决于凝胶色谱柱的尺寸大小;
  5. 按照正确的流动方向将色谱柱连接到液相系统上;
  6. 如果有机物不是正常流动相的一部分的话,要使用3个柱体积的超纯水冲洗色谱柱以去除有机物;
  7. 使用上样缓冲液进行柱平衡(通常使用3——5个柱体积);
  8. 使用QC 测试方法评价柱子的性能,以确保色谱柱能够正常使用。
  凝胶色谱柱的色谱技术是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果。
021-62176111
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